逗点生物采用新自主研发的Copure®302多功能净化柱，建立小麦粉中10种真菌毒素检测的LC-MS/MS检测方法。该方法两个水平的加标回收率均在90-100 %之间，RSD小于10%，操作简便快捷，与国内的竞品相比，具有回收率高和除杂净化效果好的优势，能够作为小麦粉中多种真菌毒素检测的参考方法。
Copure®302多功能净化柱
一、样品前处理
1.1 样品提取
称取 5 g试样于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈-水-乙酸溶液（80:19:1），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min，在6000 r/min下离心10 min，取上清液备用。
1.2 样品净化
1）向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。
2）将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端。
3）将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样品瓶或EP管中。
4）取5 mL净化提取液，40℃条件下氮气吹至近干，加入乙腈-水（50:50）溶液定容至1 mL，涡旋 30s 溶解残渣，过微孔滤膜，上机分析。
仪器设备：UPLC-MS/MS(Thermo Scientific TSQ Endura)
色谱柱：Commasil® BEH T-C18 (2.1 mm×100 mm,3 μm)
流动相： A：5mM乙酸铵（0.1%甲酸）溶液 B：乙腈（0.1%甲酸）溶液
流动相梯度：初始90%A，40%A（0 min~2 min），10%A（2 min~6 min），10%A（6min~7min），90%A（7min~8min），90%A（8min~10min）
流速：0.3 mL/min 柱温：室温 进样体积：5.0 mL
【质谱条件】
鞘气压力：30 arb 辅气压力：8 arb 离子传输管：300 ℃ 辅气温度：350 ℃
检测方式：多离子反应检测（MRM）；
扫描方式：正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI- ）
表1 离子选择参数
注：玉米赤霉烯酮检测为负离子模式（ESI-），其他均为正离子模式（ESI+）；
三、实验结果
表2 小麦粉中10种真菌毒素加标回收实验结果
从表2中可知，使用Copure® 302多功能净化柱处理后，得到10种多毒素（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，玉米赤霉烯酮，呕吐毒素，T-2毒素，赭曲霉毒素，伏马毒素B1、B2）的回收率均在90-110%之间，RSD小于10 %，整体回收率评价优于国内A品牌。
图1 不同品牌多功能净化柱处理加标样品后的TIC色谱图（①小麦粉样品-未净化处理 ②国内A品牌-净化处理 ③Copure®302-净化处理 ）
四、订购信息
一、样品前处理
1.1 样品提取
称取 5 g试样于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈-水-乙酸溶液（80:19:1），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min，在6000 r/min下离心10 min，取上清液备用。
1.2 样品净化
1）向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。
2）将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端。
3）将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样品瓶或EP管中。
4）取5 mL净化提取液，40℃条件下氮气吹至近干，加入乙腈-水（50:50）溶液定容至1 mL，涡旋 30s 溶解残渣，过微孔滤膜，上机分析。
仪器设备：UPLC-MS/MS(Thermo Scientific TSQ Endura)
色谱柱：Commasil® BEH T-C18 (2.1 mm×100 mm,3 μm)
流动相： A：5mM乙酸铵（0.1%甲酸）溶液 B：乙腈（0.1%甲酸）溶液
流动相梯度：初始90%A，40%A（0 min~2 min），10%A（2 min~6 min），10%A（6min~7min），90%A（7min~8min），90%A（8min~10min）
流速：0.3 mL/min 柱温：室温 进样体积：5.0 mL
【质谱条件】
鞘气压力：30 arb 辅气压力：8 arb 离子传输管：300 ℃ 辅气温度：350 ℃
检测方式：多离子反应检测（MRM）；
扫描方式：正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI- ）
表1 离子选择参数
注：玉米赤霉烯酮检测为负离子模式（ESI-），其他均为正离子模式（ESI+）；
三、实验结果
表2 小麦粉中10种真菌毒素加标回收实验结果
从表2中可知，使用Copure® 302多功能净化柱处理后，得到10种多毒素（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，玉米赤霉烯酮，呕吐毒素，T-2毒素，赭曲霉毒素，伏马毒素B1、B2）的回收率均在90-110%之间，RSD小于10 %，整体回收率评价优于国内A品牌。
图1 不同品牌多功能净化柱处理加标样品后的TIC色谱图（①小麦粉样品-未净化处理 ②国内A品牌-净化处理 ③Copure®302-净化处理 ）
四、订购信息