深圳逗点生物技术有限公司

Copure® HLB Lim柱，是采用特殊吸附剂装填而成的一款新型固相萃取柱。与传统SPE柱相比，它能更加快速有效地去除样品中脂肪、磷脂、色素等多种干扰物，减少基质效应；同时其极大地简化了前处理流程，省去活化、平衡步骤，样品经提取后直接过柱，节省大量时间及试剂，使前处理变得更加的简便高效。

本方案采用Copure® HLB Lim，对地塞米松、倍他米松和阿托品三种药物进行了加标验证，高中低三水平下，猪肉和猪肝样品的回收率在85%~110%，RSD＜10%,满足日常实验需求。

一、样品提取  
准确称取粉碎均匀的样品2 g于干净离心管中，加入10 mL 0.2%甲酸乙腈:水=80:20（V:V）溶液，涡旋混匀后超声提取15 min，8000 r/min离心5 min，待净化。

二、样品净化（Copure® HLB Lim，200mg/3mL ）
取1.5 mL上述上清液过柱，收集流出液，取其中1 mL氮吹近干后用0.1%甲酸水定容至1 mL，过尼龙滤膜，上机。

三、基质标准曲线溶液的制备
选同类型空白肉类样品，按上述前处理方法进行操作，收集过柱流出液，取其中1 mL于干净离心管中，加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为2 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L的标准曲线。

四、仪器条件
1）色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TSQ Endura）
色谱柱：Commasil® 兽残柱 (2.1 mm×100 mm，3 μm)
流动相：A：水（0.1 %甲酸）   B：甲醇：乙腈=2:8（0.1 %甲酸）
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
流速：0.3 mL/min
柱温：35℃
进样量：10 μL

表1 梯度洗脱程序

2）质谱条件
离子源：HESI
电喷雾电压：3500 V
鞘气压力：40 arb
辅气压力：10 arb      
离子传输管：380 ℃
辅气温度：350 ℃

表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）

五、实验结果

表3  36种兽残加标回收实验结果