深圳逗点生物技术有限公司

五氯酚作为氯代烃类杀虫剂和灭真菌剂, 具有低成本优势， 被广泛地用作农业杀虫剂、除草剂和木材防腐剂，其化学性质稳定，残留时间长，难以降解，具有较高的水溶性。本实验参考国标GB 23200.92-2016对样品前处理进行优化后，建立了一个稳定可靠，回收率高，且适合动物源性食品中五氯酚残留量测定的SPE-UPLC-MS/MS方法。


一、样品提取  
称取试样2.0 g（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入5 mL 8 %三乙胺的乙腈-水溶液（8:2，v/v），涡旋混匀5 min，超声提取5 min，在10000 r/min离心5 min，取上清液于另一支干净试管中，残渣重复提取1次，合并提取液，待净化。（注：若合并后的上清液较浑浊，可再次进行离心）

二、样品净化（Copure® MAX,60mg/3mL）
活化：依次用5 mL甲醇，5mL水活化Copure® MAX固相萃取小柱；
上样：取待净化液加入已活化好的固相萃取小柱；
淋洗：依次用5 mL 5 %氨水溶液、5 mL甲醇和5 mL 2 %甲酸甲醇溶液淋洗；
洗脱：用4 mL 8 %甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，于 40 ℃水浴下氮吹浓缩至 1 mL 左右，用水定容至2 mL，涡漩，过PTFE亲水滤膜，上机测试。

三、标曲配制
选同类型空白样品，按上述前处理方法进行操作，收集过柱流出液，加入适量的标液后与样品一同于40 ℃下水浴氮吹浓缩至 1 mL 左右，用水定容至2 mL，配制浓度点为0.5 ng/mL、1 ng/mL、2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL的系列标准溶液。

四、仪器条件（Thermo Fisher TSQ Endura）
【液相部分】：
色谱柱：Commasil® Coreshell C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)
流动相：A：5 mmol/L乙酸铵溶液（含0.1 %甲酸）  B：甲醇
流速：0.35 mL/min   柱温：35 ℃   进样量：5 μL
洗脱程序：梯度洗脱表1

表1