一、样品提取
称取2.0 g试样于50 mL离心管中,加入5 mL硫酸锌溶液(120 g/L),混匀后,乙醇氨水溶液25 mL,涡旋混合1 min,超声提取15 min,以8000 r/min离心5 min,取上清液于干净50 mL离心管中,再加入15 mL提取液重复提取1次,合并上清液,定容到50 mL(若浑浊再次离心),取10 mL上清液,在50℃下氮气浓缩至2 mL,再加入10 mL 5%甲醇水溶液,混匀后作为待净化液。
注:乙酸氨水溶液:乙醇700 mL,氨水4 mL,用水定容至1 L。
二、样品净化(Copure® WAX, 150 mg/6mL)
活化:依次用6mL甲醇和6mL水活化;
上样:将上述待净化液过柱,弃掉流出液;
淋洗:依次用5 mL水和5 mL甲醇淋洗,抽干小柱;
洗脱:8 mL 2%氨化甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,于45 ℃氮吹仪浓缩至0.3 mL左右,加入0.02mmol/L乙酸铵溶液(pH=9.0)复溶至2mL,涡旋混匀,过PTFE滤膜,上机。
三、仪器条件
仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000
色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)
流动相:A:0.02mol/L乙酸铵溶液 B:甲醇
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:1.0 mL/min
柱温:30 ℃
进样量:10 μL
检测器:紫外检测器
检测器波长范围:400~800 nm,柠檬黄测定波长为415 nm;新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、赤藓红测定波长为520 nm;亮蓝测定波长为630 nm。

表1 梯度洗脱程序
四、实验结果
(1)加标回收实验结果

表2 加标水平为5 mg/kg回收结果
(2)奶茶中着色剂色谱图

图1奶茶添加水平(5.0 mg/kg)中8种着色剂色谱图
五、订购信息
