大环内酯类化合物是从链霉菌培养液种分离出来的一类抗生素，由于对革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌和支原体都有很强的抗菌活性，被用作预防疾病和促进生长的饲料添加剂，广泛应用于禽畜生产中。本方法以QuEChERS为净化手段，选择鸡肉、猪肉和猪肝为代表，对禽肉、畜肉和动物内脏三种类型的基质做了三个不同水平加标验证，回收率满足70%~106%，RSD＜10%，符合使用要求，可供客户选择。
一、样品提取（Copure® 兽残QuEChERS提取管，货号：COQ050051）
准确称取粉碎均匀的肉类样品2 g于干净离心管中，加入2 mL 水，涡旋1 min，加入10 mL 1%乙酸乙腈溶液，涡旋1 min，加入Copure® 兽残QuEChERS盐包，涡旋混匀后超声提取10 min，5000 r/min离心2 min，待®净化。
二、样品净化（Copure® 兽残QuEChERS净化管，货号：COQ015604）
取6 mL上清液于Copure® 兽残QuEChERS净化管，2500 r/min涡旋2 min，8000 r/min离心5 min，取上清液5 mL，氮吹近干后用0.1%甲酸水：甲醇=9:1溶液定容至1 mL，上机
三、基质标准曲线溶液的制备
选同类型空白肉类样品，按上述前处理方法进行操作，取净化后的上清液加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为2 μg/L、10 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、500 μg/L的标准曲线。
四、仪器条件
1）色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TSQ Endura）
色谱柱：Commasil® 兽残柱 BEH T-C18 (2.1 mm×100 mm，3 μm)
流动相：A：水（0.1 %甲酸） B：甲醇
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
流速：0.3 mL/min
柱温：35℃
进样量：10 μL
表1 梯度洗脱程序
2）质谱条件
离子源：HESI
电喷雾电压：3500 V
鞘气压力：40 arb
辅气压力：2 arb
离子传输管：380 ℃
辅气温度：350 ℃
表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）
五、实验结果
表3 兽残加标回收实验结果
图2 添加水平为10 μg/kg时猪肝样品中9种大环内酯类总离子流图
图3 添加水平为10 μg/kg时鸡肉样品中9种大环内酯类总离子流图
六、订购信息
