
大环内酯类化合物是从链霉菌培养液种分离出来的一类抗生素,由于对革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌和支原体都有很强的抗菌活性,被用作预防疾病和促进生长的饲料添加剂,广泛应用于禽畜生产中。本方法以QuEChERS为净化手段,选择鸡肉、猪肉和猪肝为代表,对禽肉、畜肉和动物内脏三种类型的基质做了三个不同水平加标验证,回收率满足70%~106%,RSD<10%,符合使用要求,可供客户选择。
一、样品提取(Copure® 兽残QuEChERS提取管,货号:COQ050051)
准确称取粉碎均匀的肉类样品2 g于干净离心管中,加入2 mL 水,涡旋1 min,加入10 mL 1%乙酸乙腈溶液,涡旋1 min,加入Copure® 兽残QuEChERS盐包,涡旋混匀后超声提取10 min,5000 r/min离心2 min,待®净化。
二、样品净化(Copure® 兽残QuEChERS净化管,货号:COQ015604)
取6 mL上清液于Copure® 兽残QuEChERS净化管,2500 r/min涡旋2 min,8000 r/min离心5 min,取上清液5 mL,氮吹近干后用0.1%甲酸水:甲醇=9:1溶液定容至1 mL,上机
三、基质标准曲线溶液的制备
选同类型空白肉类样品,按上述前处理方法进行操作,取净化后的上清液加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶,配制成上机浓度分别为2 μg/L、10 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、500 μg/L的标准曲线。
四、仪器条件
1)色谱条件
仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)
色谱柱:Commasil® 兽残柱 BEH T-C18 (2.1 mm×100 mm,3 μm)
流动相:A:水(0.1 %甲酸) B:甲醇
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:0.3 mL/min
柱温:35℃
进样量:10 μL
表1 梯度洗脱程序
2)质谱条件
离子源:HESI
电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:40 arb
辅气压力:2 arb
离子传输管:380 ℃
辅气温度:350 ℃
表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子)
五、实验结果
表3 兽残加标回收实验结果
图2 添加水平为10 μg/kg时猪肝样品中9种大环内酯类总离子流图
图3 添加水平为10 μg/kg时鸡肉样品中9种大环内酯类总离子流图
六、订购信息