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深圳逗点生物技术有限公司

色谱样本分析制备耗材、食品微生物检测、生物样本前处理、生物工艺及制药、生命科学...

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色谱样本分析制备耗材、食品微生物检测、生物样本前处理、生物工艺及制药、生命科学工具、滤芯及过滤耗材
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公司动态
Copure® 96孔PPT蛋白沉淀过滤板|血清中4种药物含量的分析
发布时间:2023-01-19        浏览次数:225        返回列表
 
逗点生物推出了Copure® 96孔PPT蛋白沉淀过滤板,它采用自主设计的过滤材料,能有效地阻截蛋白沉淀。实验过程中仅需在孔中依次加入蛋白沉淀剂和液体生物样本(如血清、血浆等),经充分混合、蛋白沉淀后,再施加正压或离心收集流出液,即得到可供上机测试的样品。
 
本文使用乙腈(0.1%甲酸)作为沉淀剂,分析了血清中4种不同类型药物(去甲替林、酮基布洛芬、氟尼酸、吲哚洛尔)的含量;在1-10 ng/mL浓度下,加标浓度回收率在70-110%,RSD<8%,可以满足实际检测需求。
 
一、样品提取  
取300μL的乙腈(0.1%甲酸)置96孔PPT蛋白沉淀过滤板中作为沉淀剂,加入100μL血清样品,将96孔板封膜,置于接收板上,两板的96孔对准后于1500rpm涡旋5min使其混合均匀。
采用正压方法将蛋白沉淀完全的溶液全部过滤到96孔收集板中,收集板中得到滤液,封膜后上机检测。
注:使用正压仪器过滤时,压力推荐为1mL蛋白沉淀板:4~20Psi; 2mL蛋白沉淀板:10~100Psi
 
二、仪器设备
企业微信截图_16738578565825
biocomma®96孔正压提取装置
企业微信截图_1673857971968
biocomma®热封膜仪
 
三、仪器条件
1)色谱条件
仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)
色谱柱:Commasil® T-C18 (2.1 mm×100 mm,3 μm)
流动相:A:水(0.1 %甲酸)   B:甲醇(0.1 %甲酸)
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:0.3 mL/min
柱温:35℃
进样量:5 μL

1 梯度洗脱程序

2)质谱条件
离子源:HESI
电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:40 arb
辅气压力:2 arb      
离子传输管:380 ℃
辅气温度:350 ℃

表2 组分名称及特征离子一览表(*为定量离子)


四、实验结果

表3  4种药物加标回收实验结果
图片1
图1 加标浓度为1ng/mL时血清中4种药物TIC色谱图

五、订购信息
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