
《GB/T 20746-2006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》
喹乙醇是一种具有促生长作用的药物性添加剂,具有蓄积毒性,对多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在的危害,因而被禁止用作饲料添加剂。喹乙醇本身并不稳定,在体内短时间内会发生代谢,其主要代谢产物3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)比较稳定,是食品法典委员会认定的标示残留物。
逗点生物建立了猪肉中MQCA的液相色谱-串联质谱分析方法。样品经前处理提取,过Copure ®MAX固相萃取柱净化,氮吹复溶后,上相色谱-串联质谱测定,内标法定量,测试结果符合标准要求。


一、样品提取
准确称取搅碎后的猪肉5.00 g(精确至0.01g),置于50 mL离心管中,加入10 mL 0.6 %甲酸溶液,混匀后,置于47℃振荡水浴振摇1 h。先加入3 mL 1.0 mol/L Tris溶液,混匀,再加入0.3 mL 0.01 g/mL蛋白酶水溶液,充分混匀后,置于47℃振荡水浴中酶解16-18 h。冷却至室温,再加入20 mL 0.3 mol/L盐酸溶液,振荡5 min,在10℃下10000 r/min下离心5 min,过滤上清液,待净化。
二、样品净化
分别用3.0 mL甲醇、3.0 mL水活化Copure ®MAX萃取柱(60 mg/3 mL),然后将上述待净化液加入固相萃取柱,待样液全部流出后,用30 mL 50 mmol/L乙酸钠-甲醇溶液(19+1)清洗离心管后过固相萃取小柱,压干。然后依次用30 mL 0.05 mol/L乙酸钠-甲醇溶液(19+1)、3×3.0 mL甲醇、3.0 mL水、3×3.0mL 0.1 mol/L盐酸溶液、2×3.0 mL甲醇-水溶液(1+4)、2.0 mL乙酸乙酯淋洗,抽干小柱。加入3.0 mL 2%甲酸乙酸乙酯溶液洗脱MQCA至玻璃氮吹管中,于45℃下氮气吹至近干。加入1.0 mL 0.1% 甲酸-甲醇(19+1)溶液,涡旋复溶,0.22 μm滤膜过滤,供液相色谱-串联质谱仪测定。
三、仪器条件
3.1 色谱条件
仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)
色谱柱:Commasil ® AQ-C18(2.1 mm×100 mm,3 μm)
流动相:A:0.1 %甲酸水 B:甲醇
流速:0.3 mL/min
柱温:30℃
进样量:10 μL
洗脱方式:梯度洗脱,见表1。
表1:梯度洗脱程序

3.2 质谱条件
离子源:HESI
电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:40 arb
辅气压力:2 arb
离子传输管:380 ℃
辅气温度:350 ℃

表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子)
四、实验结果

表3 3-甲基-喹恶啉-2-羧酸加标回收实验结果

图1 加标水平为2.0 μg/kg时猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸总离子流图

图2 加标水平为2.0 μg/kg时猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸提取离子色谱图
五、订购信息


3.2 质谱条件
离子源:HESI
电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:40 arb
辅气压力:2 arb
离子传输管:380 ℃
辅气温度:350 ℃

四、实验结果

表3 3-甲基-喹恶啉-2-羧酸加标回收实验结果

图1 加标水平为2.0 μg/kg时猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸总离子流图

图2 加标水平为2.0 μg/kg时猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸提取离子色谱图
五、订购信息
