准确称取粉碎匀浆后的鸭肉样品2.00 g(精确到0.01 g)于50 mL具塞离心管中,加入同位素内标工作液,加入4 mL水,涡旋30 s,将样品充分分散。依次加入0.5 g氯化钠和10 mL乙腈,涡旋10 min,8000 r/min离心1 min;取6 mL上清液至15 mL具塞离心管中,待净化。


二、净化
向6 mL上清液中加入QuEChERS净化管(COQ015249)中,涡旋30 s,8000 r/min离心1 min。取5.0 mL上清液至15 mL离心中,于40°C水浴氮吹至干,用乙腈-水溶液(45:55,V/V)定容至1.0 mL,加入2.0 mL正己烷,涡旋10 s,10000 r/min离心3 min,取下层溶液过0.22 μm尼龙膜上机测试。
三、基质曲线的制备
3.1 空白试验:称取空白鸭肉2.00 g(精确至0.01 g)按照上述步骤进行提取、净化上机测试。
3.2 基质曲线:称取6个空白基质按上述提取、净化步骤操作,于净化液中分别加入适量外标和内标使用液,氮吹,定容,使终上机溶液浓度分别为1.00 μg/L、2.00 μg/L、5.00 μg/L、10.0 μg/L、15.0 μg/L、20.0 μg/L。
四、仪器条件
四、仪器条件
4.1 色谱条件
仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)
色谱柱:Commasil®AQ-C18 (2.1 mm×100 mm,3 μm)
流动相:A:0.1%甲酸水 B:乙腈
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:0.3 mL/ min
柱温:35 ℃
进样量:5 μL

表1 梯度洗脱程度

表1 梯度洗脱程度
4.2 质谱条件
离子源:HESI 电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:30 arb 辅气压力:2 arb
离子传输管:380 ℃ 辅气温度:350 ℃


表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子)
五、实验结果
5.1 线性范围

表3 线性关系
5.1加标回收

表4 样品加标回收率

图1 添加水平为1.00 μg/kg时鸭肉中利福平及内标提取离子图

图2 添加水平为1.00 μg/kg时鸭肉中阿奇霉素提取离子图

五、实验结果
5.1 线性范围

表3 线性关系
5.1加标回收

表4 样品加标回收率

图1 添加水平为1.00 μg/kg时鸭肉中利福平及内标提取离子图

图2 添加水平为1.00 μg/kg时鸭肉中阿奇霉素提取离子图
